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技術(shù)文章
  • 2019

    12-25

    ELISA試劑盒在冬季應(yīng)如何保存?

    ELISA試劑盒在冬季的保存方法:1.要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。2.樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。...
  • 2019

    10-26

    ELISA試劑盒試驗中常用到的封閉液配置方法

    ELISA試劑盒的實驗中的封閉液小知識:ELISA試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:1、elisa實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。3、加蔗糖的主要目的是保護(hù)ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護(hù)劑”的作用。4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經(jīng)過BSA封閉后加,當(dāng)然也有將蔗糖加到封閉液中同時進(jìn)行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數(shù)選擇前者。封閉劑還可用5%的脫...
  • 2019

    9-25

    如何保證ELISA試劑盒使用的安全性?

    ELISA試劑盒中抗體有包被抗體和酶標(biāo)抗體,這兩種抗體是一種抗體,前者沒有酶標(biāo),后者用酶進(jìn)行了標(biāo)記.NCM-ELISA一般有一抗和二抗,這兩種抗體不一樣,前者(一抗)一般是鼠抗體或兔抗體,沒有酶標(biāo),相對應(yīng)的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗體,用酶進(jìn)行標(biāo)記.也有用馬大規(guī)模備抗體的.TDS-ELISA是三抗體ELISA,第三級的抗體是將信號級聯(lián)放大.以上三種是比較常見的,還有其他一些試劑盒,可參考免疫學(xué)的內(nèi)容.一、保證ELISA試劑盒安全性的方法:1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一...
  • 2019

    9-20

    ELISA試劑盒的清潔會影響試驗結(jié)果

    ELISA試劑盒通常情況下又被稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,ELISA檢測試劑盒等等,自問世以來,就的達(dá)到了科研人員的大力認(rèn)可。ELISA實驗法近幾年來被廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域的免疫學(xué)檢測方面,尤其是當(dāng)它檢測的特異性被提高,越來越被人們接受和使用。ELISA試劑盒的清潔直接影響到了試驗成果,關(guān)于一項試驗的成果來說,不光要試驗室保持良好的環(huán)境,器件試劑等方面也是一樣的。下面我們來說說ELISA試劑盒試驗清潔的重要影響。1.洗板①保證洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選干凈、無或少...
  • 2019

    8-27

    ELISA試劑盒顯色溫育反應(yīng)

    ELISA試劑盒廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中,有著靈敏度高、特異性強、經(jīng)濟性較好等優(yōu)點,下面我們來說說ELISA試劑盒的顯色溫育反應(yīng)。ELISA試劑盒約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。ELISA試劑盒實驗中...
  • 2019

    6-19

    便攜式熒光定量PCR儀的產(chǎn)品特點及功能介紹

    便攜式熒光定量PCR儀實時監(jiān)控,自動陰陽性結(jié)果判斷,自動建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,相對、定量、多重定量,熔解曲線,基因突變,SNP,質(zhì)控圖形分析,PCR擴展效率計算,高分辨熔解曲線等。便攜式熒光定量PCR儀,即可對目的基因進(jìn)行現(xiàn)場普及化快速檢測。將在30-120分鐘內(nèi)完成檢測。與此同時,實現(xiàn)了可同步檢測DNA、RNA混合樣本的檢測,應(yīng)用于基因組學(xué)、傳染病研究、干細(xì)胞研究、腫瘤和遺傳學(xué)疾病研究、藥物研究和個性化用藥、法醫(yī)鑒定、分子信號和免疫應(yīng)答通路、食品安全檢測、轉(zhuǎn)基因檢測、動物源性成分分...
  • 2019

    3-25

    哪些因素會影響ELISA試劑盒的實驗結(jié)果錯誤?

    血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致,ELISA試劑盒分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:1.內(nèi)源性物質(zhì)普遍認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì),可以不同程度影響檢測結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有:類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。(1)類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子(RF)可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標(biāo)記二抗的FC段直接結(jié)合,從而導(dǎo)致假陽...
  • 2019

    3-19

    ELISA試劑盒使用時出現(xiàn)的問題如何解決?

    ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面我們來說說ELISA試劑盒操作時出現(xiàn)的問題如何解決。一、選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。二、加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶...
  • 2019

    2-26

    J2單克隆抗體的特異性及穩(wěn)定性了解

    J2單克隆抗體的稀釋:10010200(200ug)加入220ul無菌蒸餾水稀釋,重懸后濃度:1.00mg/ml10010500(500ug)加入550ul無菌蒸餾水稀釋,重懸后濃度:1.00mg/ml由于凍干過程中,稀釋的抗體可能含有少量的變性蛋白聚合物,這些蛋白可能會對免疫組化實驗產(chǎn)生高背景。因此,我們推薦在使用前,抗體重懸后,需離心,使用其上清。J2單克隆抗體的特異性:J2單克隆抗體識別雙鏈RNA的螺旋是40或大于40bp的結(jié)構(gòu)。該抗體對雙鏈RNA的識別不依賴于抗原的序...
  • 2019

    2-22

    J2單克隆抗體的制備過程介紹

    J2單克隆抗體的制備過程:1.免疫動物免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的過程。一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。2.細(xì)胞融合采用二氧化碳?xì)怏w處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。將準(zhǔn)備好的同系骨髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細(xì)...
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